三骨及软骨肿瘤免疫细胞化学标记骨肿瘤种类

在实际工作中要引起我们注意的是有时一些小细胞肉瘤浸润人横纹肌组织,在瘤细胞中混杂一些萎缩状横纹肌细胞,出现肌球蛋白抗体阳性,而不是横纹肌肉瘤

骨肿瘤种类繁多,大体上分为生骨性,软骨性,纤维性,纤维组织细胞性,破骨细胞性以及各种软组织、骨髓细胞、胚胎残余细胞产生的肿瘤等等看来复杂,实际上骨组织是由成骨(骨软骨)性组织与一般间叶性细胞构成后者与前述软组织肿瘤相一致总体上看骨肿瘤是在间叶组织基础上的特殊性肿瘤现重点将成骨,成软骨及破骨性肿瘤的免疫细胞化学标记予以讨论

1.平滑肌肿瘤平滑肌肿瘤在he染色组织学改变可与纤维性,神经纤维性及纤维组织细胞肿瘤相混淆目前缺乏对平滑肌的专一性抗体,只有采用间接排除法肌动蛋低度恶性滑膜肉瘤白,肌浆球蛋白及结蛋白对平滑肌肿瘤标记强阳性,而组织细胞阴性加上肌球蛋白和s—100蛋白表达阴性则排除了纤维组织细胞瘤和神经源以及横纹肌肿瘤层粘蛋白可在平滑肌和雪旺氏细胞肿瘤阳性表达,可用此区别纤维性肿瘤

二、软组织肿瘤免疫组织化学

2.腺泡状软组织肉瘤本肿瘤形态特点也较明确当初有人认为来源于雪旺氏细胞但s—100阴性fisher等认为是肌源性发生,因为电镜发现瘤细胞中有中间丝结蛋白与波纹蛋白而mukai持反对意见认为这是非特异性的免疫组化,肌球蛋白阴性有人认为是非嗜铬性副节 瘤

平滑肌与雪旺氏细胞,基底膜

2.上皮样肉瘤该肿瘤的组织发生尚未完全肯定但认为与滑膜肉瘤有相关性在电镜上得到支持它亦有纤维型和趋上皮分化倾向肺滑膜肉瘤瘤细胞呈结节 状排列,中央易见到坏死免疫组化显示细胞内纤维连接蛋白、肌动蛋白及波纹蛋白阳性表达

(1)角蛋白(keratin)

肌母细胞,部分内皮细胞及肌细胞

1.滑膜肉瘤滑膜肉瘤是由纤维型与上皮型两种细胞组成的双向分化肿瘤分化高者上皮细胞呈腺样或裂隙排列,与纤维型瘤细胞分界清楚而分化低者两型瘤细胞混染组成,分界不清也有以某一成分占优势的单相滑膜肉瘤应用纤维连接蛋白纤维型瘤细胞浆内阳性有别于其他肉瘤细胞在细胞外阳性波纹蛋白亦可阳性上皮型成分细胞角蛋白阳性组织细胞标记抗体阴性纤维细胞型单相滑膜肉瘤应与纤维肉瘤及纤维母细胞性恶性纤维组织细胞鉴别,可用纤维连接蛋白来区别另外再加用组织细胞与上皮性标记来辅助区别

上述各种滑膜肉瘤早期症状抗原抗体标记效果一般与其被标记细胞含抗原量呈正相关一般良性瘤与正常细胞的反应相一致而恶性肿瘤由于分化差,标记反应与分化程度呈平行关系,分化很低者则可呈弱或阴性反应例如lysozyme与myosin在恶性肿瘤可不表达要注意中间丝抗体在各种间叶细胞之间有交叉反应尤其是波纹蛋白抗体更为广泛赖日权等报告(1990年)发现128例上皮性肿瘤中有45例(35.1%)有波纹蛋白表达因此告诫我们最好应用几种同功效抗体一起标记,并结合组织学改变综合分析,评价标记效果更为准确

(12)a—1 抗胰蛋白酶(α—antitrypsin)

3.软组织尤文氏肉瘤本瘤由小细胞肉瘤细胞组成它与腺泡状横纹肌肉瘤神经母细胞瘤及转移性小细胞癌很相似它缺乏特异性标记抗体波纹蛋白阳性,表滑膜肉瘤骨转移明它来源于间叶细胞应用肌球蛋白,s—100及nse标记阴性而其他三种肿瘤分别阳性再加作糖元染色,瘤细胞胞浆阳性而确定诊断

上皮与肌上皮细胞

软组织亦称间叶组织,它的广义包括结缔组织、脂肪组织、肌肉、血管、滑膜、周围神经以及骨组织等本节 研究的对象为来源于这些组织的肿瘤,与一些与之相关但组织发生尚不太明了的肿瘤的免疫细胞化学标记软组织恶性肿瘤虽然只占人体全部恶性肿瘤的1%左右但由于这类肿瘤形态很相似在常规切片下确定其组织发生,常是临床病理诊断中的难题之一,为病理工所关注由于免疫细胞化学的发展,研制成许多标记抗体,提供了确定软组织肿瘤的组织发生的和鉴别诊断应用的标记抗体但是有的抗体特异性不够,存在交叉反应以及肿滑膜肉瘤骨转移瘤细胞的异质性、多向分化潜能等问题,致该项技术仅为临床诊断解决了部分问题,尚有许多问题有待进一步解决

肌组织分化细胞

周围神经,朗格罕氏细胞,黑色素细胞、单核/巨噬细胞,淋巴结内的小结树突细胞

骨与软骨细胞

脂肪肉瘤由脂母细胞和前母细胞组成,有高分化型,粘液型,圆细胞及多形细胞型,后两型与未分化肉瘤与多形性横纹肌肉瘤,恶性纤维组织细胞瘤很难区别如果仅凭有无脂母细胞来确诊是不行的因为“恶性纤维组织细胞”亦有脂肪染色阳性细胞但脂肪肉瘤缺乏特异性免疫组化标记抗体s—100蛋白对成熟脂细胞阳性,但脂肪肉瘤阴性目前只有采用系列性抗体来排除多形性横纹肉瘤与恶性纤维组织细胞而确诊

(5)肌浆球蛋白(myosin)

纤维组织肿瘤缺少专一滑膜肉瘤症状性抗体标记特别分化较低的纤维肉瘤,一般应用masson 或van gieson染色,再用肌源性抗体等排除法来确诊,对双向分化的恶性纤维组织细胞瘤,应采用纤维与组织细胞两种标记抗体即可应用vimentin和抗胰蛋白酶或抗糜蛋白酶抗体标记取得满意的结果,如果是多形性恶性纤维组织细胞瘤常与多形性脂肪肉瘤及多形性横纹肌肉瘤相混,鉴别困难时,则应辅以肌球蛋白等抗体进行区别

至今组织发生尚未完全肯定的软组织肿瘤有颗粒细胞瘤,腺泡状软组织肉瘤,尤文氏肉瘤,粘液样软骨肉瘤,腱鞘透明细胞肉瘤等现分述如下:

4.脑膜瘤与肉瘤良性脑膜瘤一般易于诊断,但恶性(间变型)脑膜瘤常规切片确诊比较困难、组织学类型有纤维肉瘤样型,血管肉恶性滑膜肉瘤瘤样型,巨细胞肉瘤样型等电镜证实由未分化原始间叶细胞、中间型细胞、梭形细胞、巨细胞、上皮样细胞组成,具有双向分化的特点潘传敬等对18例间变型脑膜瘤做多种抗体标记显示:一般良性脑膜瘤不同型瘤细胞对波纹蛋白、ema、角蛋白及s—100蛋白均呈阳性反应而在恶性脑膜瘤则未分化细胞全阴性而中间型细胞则除s—100以外其余抗体可均阳性梭形细胞波纹蛋白与s—100阳性巨细胞与上皮细胞与中间型细胞反应相同

(2)血管球瘤:目前认为其增生的瘤细胞也可能来自血管周边细胞,在瘤细胞内外均显丰富的肌动蛋白和肌浆球蛋白诊断时要注意发生部位及组织学特点

标记细胞

(1)血管周边细胞瘤或肉瘤:瘤细胞包绕在裂隙状血管之外周,周边细胞第ⅷ因子阴性而瘤细胞之间富于纤维滑膜肉瘤早期症状连接蛋白但这些抗体是非特异性的,最好用多种抗体来排除其他肿瘤的可能性

骨与软骨细胞

(6)层粘蛋白(laminin)

(2)波纹蛋(vimentin)

4.腱鞘透明细胞肉瘤该肿瘤与腱鞘关系密切,成团的胞浆透明的瘤细胞由于瘤细胞中含有一些色素因此认为可能来源于滑膜或黑色素细胞新近chung和enziger研究发现,至少有2/3的病例,s—100蛋白与melamin标记阳性故来源于黑色素细胞的可能性大于滑膜em下瘤细胞中可见到发育不良的黑色素小体

这里的双向分化是指有纤维性与上皮性两种瘤细胞为主构成的肿瘤电镜观察证明肿瘤细胞包括未分化间叶细胞,上皮性细胞以及介于两者之间的中间细胞,这里讨论的双向分化肿瘤包括滑膜肉瘤,间皮肉瘤、上皮样肉瘤脑滑膜肉瘤中医治疗膜瘤或肉瘤的免疫细胞化学标记,现分述如下:

周围神经细胞

(16)碱性碗酸酶(alkaline phosphatase)

(10)s—100蛋白(s—100protein)

用于软组织肿瘤可在石蜡切片表达的抗体已有多种,请参见表12-1

三、骨及软骨肿瘤免疫细胞化学标记

表12-1 软组织细胞可用的标记抗体

2.骨骼肌肿瘤多形性横纹肌肉瘤如果能找到有横纹的带状肌母细胞,比较易于确诊,但有时找不到带状肌母细胞,易与多形性恶性纤维组织细胞瘤混淆小细胞性胚胎性横纹肌肉瘤则与软组织恶性淋巴瘤,尤文氏肉瘤,周围性神经母细胞瘤难于鉴别应用比较特异的肌球蛋白抗体就可识别肌浆球蛋白和结蛋白抗体亦可作阳性标记,因为平滑肌肿瘤不可能是小细胞性,另外加用白细胞共同抗原(lca)和s低度恶性滑膜肉瘤—100抗体则能排除淋巴瘤和神经母细胞瘤另外子宫内膜混合性mulleriam肉瘤,wilm’s瘤及恶性蝾螈瘤中出现横纹肌源瘤细胞,肌球蛋白抗体标记阳性,这对预后估计有帮助eusebi强调侵入骨骼肌的恶性上皮性细胞也可呈现肌球蛋白阳性表达,应特别注意

一、常用标记抗体

(9)肌球蛋白(myoglobin)

血管内皮细胞

(11)髓鞘基质蛋白(myelin basic protein)

(六)外周神经肿瘤免疫细胞化学标记

1.血管内皮瘤与肉瘤第ⅷ因子抗体对血管内皮细胞是很有用的标记物,尤其是良性血管瘤或血管内皮瘤而在血管内皮肉瘤,肿瘤性内皮细胞分化低者可为弱阳性或阴性最近有文献报道,波纹蛋白对内皮细胞也有良好的标记作用阳性内皮细胞位于网状纤维滑膜肉瘤早期症状包围之中也是血管肉瘤的一个形态学特点

组织细胞

(3)结蛋白(desmin)

3.间皮瘤或肉瘤按who分类分为上皮型,纤维型及混合型一般波纹蛋白对梭形细胞及部分上皮型细胞阳性表达而细胞角蛋白对上皮型及部分梭形细胞阳性

(4)肌动蛋白(actin)

间叶细胞,纤维—组织细胞及滑膜细胞,间皮细胞

恶性神经鞘瘤常与纤维肉瘤、低分化滑膜肉瘤相混淆但应用s—100、nse、髓鞘基质蛋白均为阳性标记物外周神经母细胞瘤与软组织淋巴瘤、ewing肉瘤等难于区别但应用s—100蛋白标记可阳性

(8)第vii因子(factor vii rag)

(13)a—1 抗糜蛋白酶(α—1antichymotrypsin

(四)双向分化的软组织肿瘤免疫细胞化学标记

抗原名称

1.良性骨与软骨肿瘤它们存在诊断恶性滑膜肉瘤能治好上的困难是低分化的骨与软骨肉瘤与间叶性血管外皮瘤,巨细胞瘤,“恶纤组”等不易区别尤其是骨肉瘤有骨母细胞性,软骨母细胞性,成纤维细胞性,毛细血管扩张性及小细胞性,则免疫组化标记将发生重要作用成骨肉瘤中有无骨样组织是与其他类似肉瘤鉴别的关键目前骨样组织较特异的标记抗体有碱性或酸性磷酸酶、骨生长骨白(bone growth protein, bgp)、骨形成蛋白(bone morphogenetic protein, bmp)等抗体骨肉瘤中胃样组织阳性、其他软组织肉瘤阴性iwasaki等报告mgp标记33/35例骨肉瘤,12/15例软骨肉瘤阳性表达其中软骨肉瘤bgp阳性例数与病理性分级呈正相关而“恶纤组”与巨细胞瘤中的多核肺滑膜肉瘤巨细胞为阴性而骨肉瘤中的瘤巨细胞(12/25)与骨样组织阳性高奉浔等报告bmp、波纹蛋白、肌动蛋白表达阳性对骨母细胞型骨肉瘤有诊断意义bmp、vimentin actiu 及uea-1 (荆豆凝集素)受体表达阳性对纤维母细胞型骨肉瘤有诊断价值bmp、vi-mentin 、actin、uea-1ⅳ型胶原表达阳性对纤维母细胞型骨肉瘤有诊断价值其中bmp对骨肿瘤有共同的特异性,而其他软组织肉瘤为阴性软骨肉瘤基质s—100表达阳性

(二)肌源性肿瘤的免疫细胞化学标记

组织细胞、粒细胞、软骨细胞

1.颗粒细胞瘤其形态学比较明确、he亦易于确诊但其组织发生未定过去认为它是肌源性的但肌球蛋白阴性而s—100、nse为阳性表达表明其可能是神经源性、fi肺滑膜肉瘤sher用电镜也证明了这点

骨骼肌细胞

(七)组织发生未定的软组织肿瘤

间叶分化细胞、内皮细胞

(三)血管源肿瘤免疫细胞化学标记

(3)kaposi’s肉瘤:至今该瘤的组织发生尚有争论多数认为是血管内皮细胞发生,但其临床表现与发展过程有别于血管肉瘤其由恶性短梭形细胞组成,间以许多间隙,内有红细胞,新近guarda等报道梭形细胞第ⅷ因子阳性,但也有阴性有的认为该肿瘤来源于淋巴管内皮的可能性大于血管内皮barsky指出,应用抗基底膜抗体可以区别血管与淋巴管,后者缺乏

(一)纤维组织与纤维组织细胞性肿瘤免疫细胞化学标记

第三节 软组织与骨肿瘤细胞化学

(15)酸性磷酸酶(acid phosphatose)

2.骨巨细胞瘤目前研究认为破骨性多核巨细胞滑膜肉瘤肺转移症状系由血源性单核细胞到骨组织内演变而成因此它具有组织单核细胞的相同标记而bmp与bgp表达阴性其纤维型瘤细胞可有vimentin 、actin阳性表达

(五)脂肪源肿瘤免疫细胞化学标记

组织细胞

5.骨外粘液样软骨瘤(脊索样肉瘤)这是一种十分罕见的病变常见于下肢深部组织学特点是成索与旋涡状排列的小圆形瘤细胞衬有粘液样基质,可相似于恶性脊索瘤免疫组化显示溶菌酶阳性,但s—100蛋白阴性而真正的脊索瘤相反其他标记全为阴性

(14)溶菌酶(lysizyme)

肌细胞,肌上皮细胞,肌纤维

(7)纤维连接蛋白(fibronectin)

2.血管周边细胞肿瘤血管周边细胞是包被在血管基底膜之外,是一种多能干细胞它可能产生的肿瘤有血管周边瘤或肉瘤,血管球瘤及kap滑膜肉瘤肺转移osi’s肉瘤分述如下: