ASCOCART,TC

自从年两款CAR-T疗法上市以后，细胞治疗正式登上了医疗健康的舞台。虽然昂贵的治疗费用使一般家庭无法承担，也抵挡不住各大企业与研究机构的热情。

细胞治疗目前只在血液疾病中显示出不凡疗效，而实体瘤中的研发依旧举步维艰。

作为肿瘤临床研究的最大盛会，美国临床肿瘤学会（ASCO）更是少不了各种细胞治疗的亮相-八仙过海各显神通。

除了有CAR-T，其他细胞治疗如TCR-T，CTL，TIL和DC也取得了不错的进展。每种细胞治疗我们将选取几项进展，分享给大家。

树突细胞（DC）

树突细胞（DC），顾名思义，长得“四通八达”，类似树突状的免疫细胞。DC根据来源一般分为两类：淋巴系和髓系，均起源于多能造血干细胞。DC具备吞噬和抗原呈递等功能，在肿瘤免疫中具有重要作用。

在外周组织时，DC作为人体免疫细胞的“哨兵”，到处巡视。虽然稍显稚嫩，已然具备强大的抗原内吞和加工处理能力。DC在接触抗原之后，自身也变得更加成熟老练，并“升迁”至次级淋巴组织，激发T细胞应答。

DC治疗通过采用病人自体的单核细胞在体外培养诱导生成DC，然后负载相应的肿瘤抗原，制成负载肿瘤抗原的树突细胞，再将这些树突细胞注入体内后刺激体内的肿瘤杀伤性淋巴细胞增殖，发挥长期肿瘤监视作用和肿瘤杀伤作用，达到消灭肿瘤的目的。

今年ASCO上有两项针对DC治疗的研究：一项与免疫检测点抑制剂联合在实体瘤中的应用，另一项是针对肿瘤干细胞的研究。

01

在第一项研究中，瘤内（IT）髓系DC（myDC）对开启抗肿瘤免疫至关重要，并且能够在肿瘤微环境中重启杀伤T淋巴细胞。瘤内注射检测点抑制剂可以降低调节T细胞并“溶解”PD-L1+肿瘤细胞，随后释放的抗原被myDC捕获并开启肿瘤免疫循环。

该1b临床试验共招募6名标准治疗失败的晚期实体瘤患者，包括3名黑色素瘤、2名三阴乳腺癌和1名上皮性卵巢癌。患者在瘤内注射myDC、ipilimumab和avelumab，以及静脉注射低剂量nivolumab。主要终点是安全性和可行性。

3名患者在该时段可用于评估药物响应，其中一名黑色素瘤患者获得超过8个月的持续PR，该患者此前对PD-1和CTLA-4抗体均耐药。在另外两名黑色素瘤患者中，瘤内药物注射伴随着肿瘤转移的消退。

副作用包括2名患者在注射位的瞬时2级局部疼痛，1名患者1级瘙痒，1名患者2级肺炎，1名患者皮疹，1名患者在注射部位瘙痒和皮肤红肿同时发生。细胞生物学和免疫组化分析正在进行中。

这些研究的结论告诉我们：瘤内注射myDC和免疫检测点抑制剂是可行且耐受的，并在注射部位和非注射部位释放出早期的抗肿瘤活性。

02

第二项研究中，肿瘤干细胞是导致患者抵抗化疗/放疗的主要原因之一，因此靶向这群细胞有可能解决耐药性问题。这项研究目的通过开发基于DC的疫苗来消除非小细胞肺癌（NSCLC）中的肿瘤干细胞。

研究人员从PANC-1（胰腺癌）和A（NSCLC）细胞系中成功分离和鉴定出肿瘤干细胞，它们过表达一些干细胞类似标记：NANOG,OCT4,SOX2和CD。另外，肿瘤干细胞也被验证对吉西他滨耐药。

研究对比了肿瘤干细胞和普通肿瘤细胞裂解物产生的疫苗。首先，他们比对了这两种疫苗在3种不同的培养基中表型和功能的差异。培养于X-VIVO15和AIM-V条件下的DC能提高IL-12的产生，并激活更多T细胞，主要是CTL和Th1。相反，在DendriMACS中培养的DC更多形成T调节细胞。

总的来说，数据表明改变培养成分能够改变DC分化的可塑性。另外，这项研究也强调了培养基对DC免疫疗法达到最佳效果的重要性。最后，负载肿瘤干细胞抗原的DC可能是靶向细胞治疗和解决抗药性的有效策略。

细胞毒性T淋巴细胞（CTL）

虽然DC免疫治疗展现出不错的疗效，但其细胞本身只是一个“中介”，而免疫治疗的真正执行者是杀伤细胞，如CTL。DC获得消息之后，传递给CTL，这些真正的“杀手”得到指令，一起攻击肿瘤君。那么我们就来看看今年ASCO上两项CTL进展。

01

第一项研究关于EBV相关疾病中CTL治疗结果与相关性。Tab-cel是一种靶向EBV抗原的异源T细胞疗法。研究人员认为Tab-cel的临床活性是通过EBV特异性T细胞介导的。因此，他们定量了Tab-cel治疗后循环EBV-CTLp细胞及和响应的相关性。

该研究分析了10例多中心EBV阳性相关疾病数据，包括移植后淋巴增生性疾病(PTLD)和其他EBV相关疾病。研究显示响应者(n=6;2PR和4CR)循环CTLp从基线到第34天平均上升了5.8倍（0.8-）。

5/6响应者在第34天EBV-CTLp上升≥3.8倍，另一个患者没有显著变化（0.8倍）。相反，4名无响应患者(3SD;1PD)于基线比EBV-CTLp平均下降0.3倍。统计学发现第34天循环CTLp倍数改变和临床响应有着很强相关性(p=0.)。

02

第二项研究是基于新抗原特性T细胞的1a临床试验。虽然靶向新抗原的TIL疗法在实体瘤中能获得完全和持久响应，但无法获得新鲜肿瘤样品阻碍了TIL的发展。而来自外周血的靶向新抗原的CTL疗法则是一种新选择。

这项研究主要测试靶向个性新抗原的CTL疗法的安全性和客观响应率。CD8+T细胞从不同时间点中分离并与具有新抗原的自体DC共培养，产生靶向新抗原的CTL。随后患者在不同时间点接受CTL治疗，并评估效果。

到年10月16日，共10名患者被招募，其中9名经过1-6次0.35-4×CTL回输。这9名患者包括8例转移性黑色素瘤和1例结直肠癌。招募的10名患者中7人最终得到评估。其中，1人评估为PR，1人为iPR，3人为SD，2人为PD。

客观反映率28.57%，疾病控制率为71.4%。所有参与者安全耐受，与过继细胞转移相关副作用最高等级为2级。其中2名受试者（PR和iPR）新抗原特异CTL在其外周血中持续了天。

肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）

肿瘤的形成过程中，会伴随着一些免疫细胞的浸润，特别是T细胞，因此被称为TIL。近年研究发现TIL在抗肿瘤中扮演着重要角色，因此纯化和鉴定出特异的TIL对肿瘤治疗至关重要，特别是对免疫检测点抑制剂耐药的肿瘤。

今年的ASCO有三项相关研究，关于TIL疗法在肿瘤靶向治疗和免疫治疗进展后的应用，为解决耐药性问题提供了解决方案。

01

第一项是在晚期复发宫颈癌中进行的二期临床试验，检测TIL治疗的安全性和有效性。宫颈癌患者相对年轻且生存率较低。以化疗和免疫治疗为二线治疗的ORR在4%至14%之间。而前期TIL治疗在一些患者中显示出持续响应和长期疾病控制潜力。

这项名为C--04是多中心二期临床试验，治疗经历过至少一线化疗患者，前期免疫检测点抑制剂患者被排除在外。主要终点是ORR，次要终点包括响应持续时间（DOR）和疾病控制率（DCR）。

截至年2月4日该研究总招募27名患者，平均年龄47岁，接受前期治疗为2.6次。患者接受了2代LN-治疗，ORR为44%(1CR,9PR,2uPR)，3.5个月中期随访DCR为89%，其中11/12维持响应。

其中4名患者在长期随访中观察到响应提高。回输TIL细胞平均数为28x。IL-2的平均给药剂量为6.0。这项研究说明LN-具有可接受的安全性和有效性，为晚期宫颈癌提供了一种治疗选择。

02

第二项临床试验名为C--01，验证名为LN-的TIL治疗在晚期转移性黑色素瘤中的效果，包括对靶向治疗和免疫治疗（PD-1免疫检测点抑制剂等）产生耐药的患者。

这也是一项全球多中心二期研究，评估LN-的有效性和安全性。试验共招募了55名三期/四期不可切除黑色素瘤患者，经历了平均3.1次前期治疗(anti-PD%;anti-CTLA-%;BRAF/MEK抑制剂24%)。ORR为38%(2CR,18PR,1uPR)。

21名响应者中，4人已经进展，中位随访期为7.4个月。总体疾病控制率为76%。更长期随访在某些患者中发现响应率得以提高。

这54名响应者包括大部分前期对抗PD-1治疗进展的患者以及PD-L1阴性患者(TPS5%)。回输到患者的平均细胞数为28x。IL-2的平均给药剂量为6.0。

03

最后一项研究分析了丹麦近十年来TIL治疗效果与PD-1抗体进展后的关系。该研究共分析了三项临床试验，包括55名黑色素瘤患者。该分析包括计算生存曲线和临床响应率。

研究发现：综合三项临床试验，中位OS为15.9个月，PFS为3.7个月。6名患者获得CR（11%），其中4人治疗还在进行。14名患者获得PR（26%），其中3人还在继续治疗。在中位随访时间40个月时响应者的中位OS还未达到。

前期是否经过PD-1抗体治疗患者PR并无统计差异（42%无PD-1治疗对比32%有PD-1治疗）。然而，与前期经过CTLA-4但不是PD-1抗体治疗的患者比，经历过两种单药治疗的PR患者响应持续时间会短一些。

这项研究说明：PD-1抗体治疗进展后，TIL治疗的PR可能更短，但能获得持续的CR。因此，TIL治疗依然是转移性黑色素瘤的一项治疗策略。

TCR-T

形形色色、千千万万的病原体进入人体内，是怎么被T细胞识别的？其中T细胞受体（TCR）扮演着重要的角色。T细胞通过改变TCR的序列来识别各种抗原序列，无论病原君如何千变万化，也无法逃脱T细胞的手掌心。

那么，是不是也有针对不同肿瘤类型的TCR呢？如果我们知道某种TCR能特异的结合肿瘤抗原，并招募杀伤T细胞“干掉”肿瘤细胞，是不是会很大程度提高肿瘤治疗效果？今年ASCO上有两项相关研究，一起来瞧瞧。

这两项研究都是关于针对NY-ESO-1特异性TCR。

01

第一项研究检测细胞治疗前用化疗剔除淋巴细胞（LD）对临床效果和细胞因子风暴（CRS）的影响。这项细胞治疗的名称为TBI-，用的化疗药物是环磷酰胺（CY）。

患者经过PBMC采集后处理加工成TBI-细胞。研究共注入5x个细胞，并在注入细胞前第二和第三天分别给予mg/m2CY。终点包括安全性、有效性以及生物相关性。

目前为止，9名患者经过了治疗，其中8人接受了指定剂量。这8名患者可用于评估响应和毒性，并未发现DLT。即使通过CY达到LD，所有4名滑膜肉瘤和1名黑色素瘤患者经历了1-2级CRS，伴随CRP、铁蛋白和IL-6的升高。

大部分患者CRS可自愈，其中一名由于2级恶心/呕吐需要tocilizumab治疗。还有两名患者经历了3级肿瘤相关疼痛。其他治疗相关3级或4级毒性包括中性粒细胞减少症和低磷血症。

总体响应的情况为：2个PR、5个SD和1个PD。生物标记物分析说明TBI-细胞在某些患者身上维持超过了天。这些结果说明TBI-细胞治疗安全可靠且具有相应的抗肿瘤活性。

02

第二项也是相似的研究，关于NY-ESO-1/TCR-T与CRS以及临床疗效的相关性。相比之下，该研究做了细胞数爬坡试验，从5x到5x。进行细胞治疗前给予1,mg/m2CY。

9名患者接受了TCR-T治疗，输入的细胞在5天内得到急速扩增。3名接受5x细胞患者产生早发型CRS，伴随着血清中IL-6和IFN-γ的升高。CRS一般发生在细胞输入的第一天或第二天，并能通过tocilizumab有效控制。

3名滑膜肉瘤患者显示出肿瘤缩小的PR，并且他们都具有高表达的NY-ESO-1，超过75%。扩展分析发现多种趋化细胞因子包括CCL2、CCL7和IL-3在CRS患者血清中上升。效应-记忆T细胞比例与CRS发展显著相关。

CAR-T

CAR-T的背景介绍无须赘述，每年都能收录不计其数的会议摘要。由于相关CAR-T研究数量众多，我们只选择今年ASCO其中的三项研究和大家分享。

01

第一项关于CD19和CD22的“混合双打”CAR-T疗法，用以治疗难治/复发性非霍奇金B细胞淋巴瘤（NHL）。研究的主要终点是安全性和有效性。

该研究从年3月到年1月共招募了38名患者，其中36人可用于评估。经过最少3个月随访，26名患者达到ORR，包括18人CR和8人PR。第三个月的ORR在不同亚组中是一致的，无论何种病理亚型、细胞来源或基因组异常。

在数据结算点，在第三个月具有CR的15/18患者依旧维持响应，2/8在无附加治疗情况下从PR变成了CR。总的来说，最佳ORR为83.3%，包括55.5%的CR和27.8%的PR，中位随访期为5.3个月，中位PFS为5.8个月，中位OS还未达到。

在第一次复发接受治疗的患者比初始耐药和多次复发患者有更佳的PFS。与未到达OS患者比，第三个月达到OS的患者显著延长了PFS和OS。9名具有IgH/MYC转座的患者中位随访期为10.1个月，中位PFS和OS未达到。

在7名维持响应的患者中包括全部4名双击淋巴瘤。然而，10名17p缺失或TP53突变的患者中位随访期为5.3个月，中位PFS为3.6个月，OS为9.9个月。所有患者经历了可逆的CRS，其中21.1%为高级别。13.2%患者发现低级别神经毒性。

02

第二项是一CD19CD20双靶点CAR-T研究，与“混合双打”不同，这是“一箭双雕”。该研究的适应症也是NHL，主要终点是安全性。

截至目前已有11名患者完成治疗，平均年龄54岁，包括5名DLBCL，4名MCL和2名CLL。在剂量爬坡试验中，3名患者输入2.5x细胞/kg，3名7.5x细胞/kg，3名2.5x细胞/kg。

最后2.5x细胞/kg被选为扩展治疗。安全性方面，6名患者发生1-2级CRS，3名发生1-2级神经毒性。没有发生3-4级CRS或神经毒性。4名患者需要tocilizumab治疗CRS。

28天ORR为82%，其中6/11获得CR，3/11获得PR。所有CR患者依旧处于缓解阶段，最长的超过一年。所有进展患者经历了重复活检，结果显示了CD19或CD20阳性。

03

最后一项研究关于CAR-T在实体瘤中的一期临床研究，靶向的是Claudin18.2(CLDN18.2)，一种在胃癌和胰腺癌高表达的基因。试验的主要终点是安全性和有效性。

截至年11月30号，总12名转移性腺癌患者（7名胃癌和5名胰腺癌）被招募到试验中，并接受1-5个疗程CAR-T细胞治疗（总共0.5-55X细胞）。

研究中并未发生严重副作用、治疗相关死亡和神经毒性。除了淋巴细胞、中心粒细胞和白细胞数量下降外，并未发现4级副作用。所有的CRS都为1-2级。

在11个可评估患者中，1人达到CR（胃癌），3人PR（2胃癌和1胰腺癌），5人SD和2人PD。ORR为33.3%，中位PFS是天。

小结

细胞治疗被称为“活体药物”，利用自体特异的免疫细胞去攻击肿瘤细胞，不仅能够达到靶向疗效，也能有效维持这种抗癌作用。虽然CAR-T仍然是目前发展的重点，但其他细胞治疗也是百花齐放，且取得了不错的效果。

目前被批准的细胞治疗方法主要应用于血液癌症领域，在实体瘤方面尚未建树。随着研究和技术的发展，越来越多的细胞治疗也在实体瘤中显示出初步疗效，特别是晚期癌症。联合细胞治疗和其他治疗方法，可以极大提高患者生存和生活质量。

参考文献：

JuliaKatharinaSchwarze,GilAwada,LouiseCras,RamsesForsyth,IvanVanRiet,BartNeyns.AphaseIbclinicaltrialonintratumoraladministrationofautologousCD1c(BDCA-1)+myeloiddendriticcells(myDC)in