乳腺良恶性肿瘤组织超氧化物歧化酶活性测定

乳腺良恶性肿瘤组织超氧化物歧化酶活性测定

于泽平①　吴世宽①　汪义军②

　　提要　本文对住院的16例乳腺良性或恶性肿瘤患者的瘤或癌组织及瘤旁或癌旁组织用核黄素光照产生的超氧自由基与羟胺反应的方法测定其含量。结果显示,良性肿瘤及癌组织的T-SOD(总SOD)和Mn-SOD(锰SOD)明显低于瘤旁及癌旁组织。良性肿瘤的T-SOD和Cu、Zn-SOD(铜、锌SOD)活性明显高于癌组织。良性瘤旁组织的Mn-SOD明显高于癌旁组织,提示癌组织的SOD活性明显低于良性组织,可应用抗氧化剂清除自由基,防止DNA及细胞膜损害,以预防癌症的发展。

　　关键词　乳腺肿瘤;　乳腺癌;　超氧化物歧化酶

　　在氧自由基与肿瘤关系的研究中,发现氧自由基不仅与肿瘤的发生有关,而且还影响肿瘤细胞的增殖和分化,故无论在诱癌、促癌及抗癌等方面都有作用。超氧化物歧化酶(SOD)是广泛存在于需氧组织中的一种自由基清除剂。我们测定了乳腺良、恶性肿瘤组织及瘤旁、癌旁组织的SOD活性,试探对乳腺

癌的治疗意义。

1　材料和方法

1.1　病例选择　对～年1月住院的16例乳腺良、恶性肿瘤患者行肿瘤组织SOD测定。16例全为女性,平均年龄49.5(28～71)岁。其中恶性12例(乳腺单纯癌9例,浸润性导管癌3例),良性4例(乳腺纤维瘤3例,叶状囊肉瘤1例)。

1.2　标本来源　肿瘤组织切除后,即于当时切取肿瘤组织及瘤旁乳腺组织各0.5cm×0.5cm×0.5cm大小,置于无菌瓶中,立即低温冰箱保存。

1.3　检测方法　采用本院生化科建立的核黄素光照产生的超氧自由基与羟胺反应的方法测定组织的SOD活性〔1,2〕。

2　结 　　果

2.1　良性肿瘤及瘤旁组织SOD活性对比见表1。

2.2　癌及癌旁组织SOD活性对比见表2。

2.3　良性肿瘤与癌组织SOD活性对比见表

表1、表2显示良性肿瘤及癌旁组织T-SOD、Mn-SOD的活性均明显低于瘤或癌旁组织(P0.01)。表3示癌组织T-SOD和Cu、Zn-SOD活力低于良性肿瘤(P0.05和0.01)。表4示癌旁组织Mn-SOD明显低于良性瘤旁组织(P0.01)。

3　讨 　　论

生物在自身氧化过程中产生的超氧化物阴离子自由基,具有氧化性与还原性,是一种活性氧。在正常生理情况下,氧自由基参与体内重要的生理和生化反应,但在病理情况下对机体又有严重的损害作用。SOD是超氧化物自由基的特异性清除酶,又是超氧阴离子的底物诱导酶。自McCord和Fridovich年首先从牛红细胞中发现了超氧化物歧化酶活力以来,SOD已在生物化学、临床医学等领域得到了广泛研究,是现代医学研究较活跃的课题之一

〔1〕。SOD是一类重要的氧自由基清除剂,基本功能是催化超氧离子自由基的歧化反应,清除自由基,从而阻止自由基的催化反

应

〔2,3〕。人体内存在的SOD有两种类型,即Cu、Zn-SOD和Mn-SOD,二者含量之和为总SOD

〔4〕。近年来,大量证据表明氧自由基与肿瘤及多种疾病的发生有密切关系。已知肝损害、糖尿病、肾功能衰竭和尿毒症、胃癌、胰腺癌、结肠癌、直肠癌、胆道癌及食管癌患者血清Cu、Zn-SOD显著增加。Cu、Zn-SOD广泛分

布于细胞浆、细胞核和细胞膜中,分子量左右,铜与SOD的催化活性有关

〔5〕。对于肿瘤细胞产生超氧阴离子的能力尚有不同看法,大多数学者认为肿瘤细胞产生超常的超氧阴离子。一些作者研究发现恶性肿瘤患者的血液或癌组织中的SOD活性的明显下降,说明机体内抗氧化功能受到严重损害,DNA被过量的活性氧氧化损伤,最终影响基因表达,诱发细胞癌变。Dionisi等观察到癌细胞中SOD活性降低,他们在研究中发现正常细胞和癌细胞的线粒体均能产生超

氧阴离子,正常细胞中因含有足量的SOD,能歧化超氧阴离子成H2O2,而癌细胞SOD含量减少

〔6〕。有关肝癌、生殖器官肿瘤和直肠癌的研究均证实了癌组织中的SOD

活性明显降低。Oberley等的研究表明肝癌细胞不含Mn-SOD,认为肝脏失去Mn-SOD活力是肿瘤细胞的特征。其他作者也认为肿瘤细胞SOD的总活力是降低的,尤以Mn-SOD降低或消失最为突出。癌细胞的分化程度与SOD活性亦具相关性,分化越低,SOD活性则越低。高峰等对胃癌患者血浆及组织中SOD的测定表明,胃癌组织及癌旁组织SOD活性高于胃部良性病变,推测可能系一

种代偿反应,目的在于清除自由基。乳腺良性及恶性肿瘤组织SOD活力的

报道较少。本文资料显示,良性肿瘤及癌组织的SOD和Mn-SOD明显低于瘤旁或癌旁组织,良性肿瘤的T-SOD和Cu、Zn-SOD活力明显高于癌组织,良性肿瘤瘤旁组织的Mn-SOD明显高于癌旁组织,结果与许多学者的研究相似,即恶性肿瘤组织的SOD活性较正常组织明显减低。提示有可能应用抗氧化剂清除氧自由基,以防止DNA及细胞膜损害,从而预防癌症的发生。虽然临床上利用SOD的抗氧化性能,在抗肿瘤、抗幅射、抗衰老等方面的研究已见成效,但自由基的研究仍属于新兴的亚分子生物学的范畴,从亚分子生物学角度深入研究自由基与肿瘤发生、发展的关系,不仅从理论上有助于阐明致癌作用的机理,而且从实践上对寻找肿瘤预防、诊断和治疗的新方法提供了线索