文献速递滑膜间充质干细胞衍生的EV包

2021-11-22 来源:本站原创 浏览次数:

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文献ID

Title:SynovialMesenchymalStemCell-DerivedEV-PackagedmiR-31DownregulatesHistoneDemethylaseKDM2AtoPreventKneeOsteoarthritis

研究人员:KunpengWang等

研究单位:哈尔滨医院骨科、妇产科、门诊;哈尔滨医院骨科。

发表时间:.9

期刊名称:MolecularTherapyNucleicAcids

影响因子:7.

核心亮点

通过初始生物信息学分析,首次披露miR-31和赖氨酸脱甲基酶2A(KDM2A)之间的靶向关系。确定miR-31介导影响KDM2A/E2F1/PTTG1轴在OA期间对软骨产生再生作用。

思路与方法

1.基于微阵列的基因表达谱

2.临床样本收集

3.细胞培养与转导

4.SMSCs的隔离和标识

5.从SMSCs分离和鉴定EVs

6.软骨细胞摄取EVs的免疫荧光分析

7.RNA分离与定量

8.软骨细胞增殖和迁移的细胞计数试剂盒8(CCK-8)分析和Transwell分析

9.WB分析

10.双重萤光素酶报告基因测定

11.免疫沉淀分析

12.用于评估蛋白质降解的CHX分析

13.GSTPulldown分析

14.ChIP分析

15.小鼠膝关节OA模型的建立

16.ELISA分析

17.组织学染色

18.免疫组织化学

19.统计分析

摘要

Extracellularvesicles(EVs)derivedfrommesenchymalstemcells(MSCs)haveemergedasimportantmediatorsofintercellular

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